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技術原理

   CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic圖片關鍵詞 Repeats)是最新出現的一種由sgRNA指導Cas核酸酶對靶向基因進行特定DNA修飾的技術。在這一系統中,sgRNA引導序列靶定位點剪切雙鏈DNA達到對基因組DNA 進行修飾的目的。CRISPR/Cas9系統能夠對小鼠基因組特定基因位點進行精確編輯,目前瑞思元已經成功將此技術應用于小鼠基因敲除/敲入模型制備,以及條件性敲除(Loxp系統)模型制備。      

      目前瑞思元采取優化過的野生型Cas9和雙切口Cas9n(Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn)。采用優化過的雙切口Cas9n(OCASn)可以將脫靶效應降到最低。


條件性基因敲除小鼠

      應用sgRNA-Cas9donor的方法將loxP敲入到目的基因兩側,依賴于Cre酶進行條件敲除。


圖片關鍵詞

運用

    研究完全性敲除后致死性目的基因的生理或病理功能;

   研究目的基因在特定組織或細胞中的功能;

    研究目的基因在特定時期或特定階段發揮的作用;


技術優勢

   研發周期短(4-6個月),同源重組效率高;

    打破對小鼠遺傳品系的限制,可以實現不同遺傳背景或在已有基因修飾小鼠模型基礎上進行基因編輯;

 

制備流程圖片關鍵詞


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